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細胞凍存袋分享細胞凍存方法
更新時間:2021-10-18
閱讀:1568
OriGen細胞凍存袋
產(chǎn)品簡介:
CryoStore? 袋設(shè)計用于低溫冷凍血液成分。OriGen 多室冷凍袋有二個型號,CS30M9和CS24M9。每個分室的大凍存容積是6毫升。CS30M9有五個分室,總的大冷凍容積是30毫升。CS24M9有四個分室,總的大冷凍容積是24毫升。這二個型號的多室冷凍袋都可以保存在現(xiàn)有CS50冷凍袋使用的冷凍盒中。
細胞凍存袋分享細胞凍存方法,包括以下步驟:
(1)將培養(yǎng)的細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,在200-500g條件下,離心5-8min,棄掉上清液;
(2)將離心后的細胞團先用DPBS重懸,確認細胞團被*打碎,在磁力架上靜止2-5分鐘,實現(xiàn)細胞跟磁珠的分離;
(3)用移液管將細胞懸液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,重復(fù)去磁珠操作兩次;
(4)將清除磁珠后的細胞懸液在200-500g條件下,離心5-8min,棄掉上清液,備用;
(5)根據(jù)需要凍存的細胞總數(shù)量,計算凍存介質(zhì)的體積,將細胞重懸于凍存介質(zhì)中;
(6)將細胞分裝于凍存管或者凍存袋中,放置于-80℃超低溫冰箱中緩慢冷凍8-18小時,或者放置于程序降溫儀中按照相應(yīng)程序降溫至-85℃;降溫結(jié)束后,將細胞凍存管或者凍存袋轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。
回輸需要時,在液氮條件下運送至治療醫(yī)院,在37℃條件下快速解凍后,可以直接回輸給治療病人。
所述步驟5中的凍存介質(zhì)由氯化鈉、二甲基亞砜、葡萄糖、人血白蛋白、低分子葡聚糖和RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成,其中氯化鈉的質(zhì)量濃度為0.45-0.9%,二甲基亞砜溶液的體積濃度為5-15%,葡萄糖的質(zhì)量濃度為5-20%、人血白蛋白的質(zhì)量濃度為10-50%,低分子葡聚糖的質(zhì)量濃度為5-20%。
優(yōu)選的,所述步驟5中的凍存介質(zhì),其中氯化鈉的質(zhì)量濃度為0.9%,二甲基亞砜溶液的體積濃度為10-15%,葡萄糖的質(zhì)量濃度為5-10%、人血白蛋白的質(zhì)量濃度為10-30%,低分子葡聚糖的質(zhì)量濃度為5-10%。
進一步優(yōu)選的,所述步驟5中的凍存介質(zhì),其中氯化鈉的質(zhì)量濃度為0.9%,二甲基亞砜溶液的體積濃度為10%,葡萄糖的質(zhì)量濃度為5%,人血白蛋白的質(zhì)量濃度為10%,低分子葡聚糖的質(zhì)量濃度為5%。
所述步驟5中細胞的凍存密度為1×106個/ml-500×106個/ml。
以上知識僅供參考,希望對您有所幫助!
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